1、試劑盒簡(jiǎn)介貨為了適應(yīng)米曲霉通用型染料法熒光定量PCR試劑盒快速檢測(cè)和疫病研究的需要,本公司參照 OIE 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的引物序列,經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)及系統(tǒng)優(yōu)化,開發(fā)了本試劑盒。應(yīng)用本試劑盒進(jìn)行檢測(cè)具有快速、靈敏、特異、準(zhǔn)確、安全操作簡(jiǎn)單、應(yīng)用廣泛和高通量檢測(cè)等特點(diǎn)及優(yōu)點(diǎn)。2、試劑盒組成: 試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴(kuò)增試劑,具體組成參見表 1:s 表 1:試劑盒組成(50test/盒) 試劑盒組成及試劑配制: 1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。 3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶 4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 樣本處理及要求: 1.血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。 4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 操作流程: 1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。 2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL; 3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。 4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。 6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。 樣本:血清 血漿 組織勻漿等液體樣本 標(biāo)記物:血清 血漿 組織勻漿等 應(yīng)用:僅用科研實(shí)驗(yàn)檢測(cè)定量,定性檢 檢測(cè)方法:夾心法 技術(shù)要求:全程按說(shuō)明書步驟檢測(cè),操作規(guī)范,專業(yè),儀器設(shè)備齊全。 規(guī)格:48t/96t 性狀:液體 運(yùn)輸方式:快遞發(fā)貨 有效期:6個(gè)月品 特點(diǎn):靈敏性高,---性,吸附均勻,吸附性好,回收利用率高,是一款可以讓您放心選購(gòu)的產(chǎn)品。 使用范圍:此產(chǎn)品供科研實(shí)驗(yàn)使用,不得用于---。 用途:用于測(cè)定人血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。 注意事項(xiàng): 1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。 2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。 3.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。 4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 5.底物請(qǐng)避光保存。 6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn). 7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 8.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。 9.不能使用過(guò)期產(chǎn)品。 10. 如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。 每個(gè)樣品測(cè)試反應(yīng)體系配制見下表 2。 表 2 每個(gè)樣品測(cè)試反應(yīng)體系配制表 注:本公司提供試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。需要其他檢測(cè)試劑盒請(qǐng)咨詢銷售人員。
|