Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞品牌訂購(gòu)流程：
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本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)Hep-2, 人喉癌細(xì)胞系品牌說(shuō)明書！
 
Hep-2, 人喉癌細(xì)胞系品牌細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 
78-5000 pg/mL人VGF神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白ELISA試劑盒

78-5000 pg/mLELISA Kit for Human Neurosecretory protein VGF

0.156-10 ng/mL人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Vascular cell adhesion protein 1

78-5000 pg/mL人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒

78-5000 pg/mLELISA Kit for Human Vascular endothelial growth factor A

15.6-1000 pg/mL人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mLELISA Kit for Human Vascular endothelial growth factor B
Hep-2, 人喉癌細(xì)胞系品牌層粘連蛋白α1(LAMα1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Laminin Alpha 1 (LAMa1)

志賀氏增菌肉湯 規(guī)格： 250g 用途： 用于志賀氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。（GB4789.5-2010）

人前列腺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

S-Medium(milieu S)BR10升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

Hanks’ Balanced Salt Solution (with Ca2+& Mg2+)規(guī)格：500ml

TEMED10ml國(guó)產(chǎn)

特殊蛋白胨/Peptone SpecialBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人羊膜細(xì)胞英文名稱：HAN

腦浸粉（牛）/牛腦浸粉/牛腦提取物/Brain infusion powderBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2gersion

小鼠肥大細(xì)胞細(xì)胞英文名稱：P815

假單胞分離瓊脂/Pseudomonas Isolation Agar假單胞菌群的測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Hep-2, 人喉癌細(xì)胞系品牌細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞品牌功能：
（1）       血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）       表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）       與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
 生理變化：
（1）       主動(dòng)脈硬化。
（2）       主動(dòng)脈瘤
（3）       主動(dòng)脈鈣化。
基本特性：
（1）       組織來(lái)源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）       鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）       原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）       每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）       肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）       不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。


0.78-50 ng/mL人抗肌萎縮蛋白相關(guān)蛋白(Utrophin)ELISA試劑盒

0.78-50 ng/mLELISA Kit for Human Utrophin

0.156-10 ng/mL人紡錘蛋白受體UNC5C(Netrin receptor UNC5C)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Netrin receptor UNC5C

0.78-50 ng/mL人葡萄膜自身抗原(UACA)ELISA試劑盒

0.78-50 ng/mLELISA Kit for Human Uveal autoantigen with coiled-coil domains and ankyrin repeats

0.156-10 ng/mL人泛素蛋白連接酶E3成分N識(shí)別蛋白1(E3 ubiquitin-protein ligase UBR1)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human E3 ubiquitin-protein ligase UBR1
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞品牌α2-纖溶酶抑制因子(α2PI)重組蛋白英文名稱：Recombinant Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI)

木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

Candida Elective 瓊脂/BiGGY瓊脂/坎迪達(dá)尼克森選擇性瓊脂/鉍甘氨酸葡萄糖酵母瓊脂/BiGGY Agar食品中Candida及酵母菌總數(shù)測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

化高鐵血紅蛋白參比液(100g/L)/Cyanomethemoglobin reference solution10毫升×8支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

人前列腺細(xì)胞英文名稱：PC-3

TE-10(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

SW 1990(人胰腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

SK-N-MC(人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

SF767(人腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

RWPE-2(人前列腺正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

RM1(大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

RIN-m5f(大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

QGY-7703(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞品牌運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線